為什么離子色譜柱不能直接用純水進(jìn)行沖洗呢?
很多人在使用離子色譜柱時(shí)都存在這樣一個(gè)誤區(qū):直接用純水沖洗。其實(shí)這種做法是錯(cuò)誤的,在一般情況下,如果直接使用純水對離子色譜柱進(jìn)行沖洗,很容易導(dǎo)致離子色譜柱中的固定相流失并且出現(xiàn)相塌陷現(xiàn)象,因此一般情況下并不建議直接使用純水對離子色譜柱進(jìn)行沖洗。
那么怎樣對離子色譜柱進(jìn)行沖洗呢?我們建議在純水中加入甲醇或乙腈等物質(zhì),再對離子色譜柱進(jìn)行沖洗,這樣一般不會(huì)對離子色譜柱造成影響。那么為什么離子色譜柱不能直接用純水進(jìn)行沖洗呢?原因有以下幾個(gè):
1.離子色譜柱中使用過含緩沖鹽的流動(dòng)相時(shí),用純水沖洗并不能將緩沖鹽洗去。
因?yàn)榫彌_鹽本身是難溶于有機(jī)溶劑中的,C18反相柱中用到的填料是在硅膠表面上接上的C18長鏈,這相當(dāng)于一個(gè)疏水的有機(jī)相,并且因?yàn)楣枘z基體被有機(jī)物質(zhì)包裹著,所以在操作時(shí)使用緩沖鹽水溶液做流動(dòng)相時(shí)緩沖鹽可能不容易到達(dá)硅膠基質(zhì),不至損害基體。但是使用的流動(dòng)相一般來說通常會(huì)有一些有機(jī)溶劑,而且這些有機(jī)溶劑和C18長鏈?zhǔn)腔ハ嗳芙獾?,因此有機(jī)溶劑的加入增強(qiáng)了流動(dòng)相滲入硅膠基質(zhì)的能力,能讓一部分的緩沖鹽與硅膠基質(zhì)接觸。所以直接用純水沖洗離子色譜柱只能沖洗其表面的緩沖鹽,但是滲入到離子色譜柱中深處的緩沖鹽仍舊會(huì)殘留在那里。
建議在沖洗離子色譜柱的時(shí)候,在純水中加入一部分有機(jī)溶劑,水和有機(jī)溶劑的比例視情況而定,這樣含有有機(jī)溶劑的水便能對離子色譜柱進(jìn)行沖洗了。
2.一般離子色譜柱的材質(zhì)不允許長時(shí)間被純水沖洗。
由于現(xiàn)今大部分離子色譜柱以硅膠為基質(zhì),而硅膠的性質(zhì)卻是其溶解度在純水中會(huì)比一般含有有機(jī)溶劑中要大得多,因而使用純水對離子色譜柱進(jìn)行沖洗,會(huì)讓離子色譜柱中的硅膠材質(zhì)產(chǎn)生溶解,長時(shí)間的純水沖洗會(huì)導(dǎo)致離子色譜柱中的固定相流失,從而降低了離子色譜柱的柱效。
3.對一般C18柱來說,因?yàn)镃18長鏈本身是溶解在水中的,而且C18長鏈之間的相互作用力是大于C18和水分子之間的作用力的。
如果長時(shí)間的用純水對離子色譜柱進(jìn)行沖洗,會(huì)讓C18長鏈之間相互靠近,并且使得相互聯(lián)結(jié)的C18長鏈在硅膠質(zhì)地的基質(zhì)表面上倒伏,對疏水性物質(zhì)的保留能力會(huì)因此下降,即相塌陷。為了給只能溶解在純水中的樣品提供分析條件,有些企業(yè)推出適合做離子色譜柱沖洗的純水柱,這種純水柱不會(huì)產(chǎn)生相塌陷,因而可以對只溶解在純水中的樣品進(jìn)行分析了。
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